大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞細(xì)胞簡介

　　大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞細(xì)胞簡介：
 

　　大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織得到，視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視維、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)從狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)抱。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上，而視維細(xì)胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞，約有10到數(shù)百個機紅胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞貼壁后呈單層排列，部分細(xì)胞聚集成團，細(xì)胞呈圓形或橢圓形，核圓且相對透明，有些細(xì)胞膜上伸出短而小的突起:該細(xì)胞為高度分化細(xì)胞，在體外屬于不增殖群。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞是青光眼病理性損害的主要細(xì)胞，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的死亡可導(dǎo)致視功能不可逆損傷。
 

　　大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)操作:
 

　　1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
 

　　2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞10-20s，吸走潤洗的PBS；
 

　　3.T25瓶加1ml左右胰M，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細(xì)胞層；
 

　　4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；
 

　　5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未脫落時加2-3ml培養(yǎng)基終止胰M消化；
 

　　6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min，棄上清；
 

　　7.加新的培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；
 

　　8.補足培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。