如何正確使用無血清凍存液凍存MG63細胞？

細 胞 基 本 信 息

細胞名稱： MG63(人骨肉瘤細胞)

細胞別稱： M-G63；MG63

細胞貨號： SNL-229

生長特性： 貼壁

培養條件： DMEM+10% FBS+1% P/S

培養環境： 空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%

細胞簡介： MG63細胞是從一名患有骨肉瘤的14歲白人男性患者的左股骨中分離出來成纖維細胞形態的細胞，表達TGF-β RI、TGF-β RII，使用聚肌苷-多肽酸、環己酰亞胺和放線菌素D可以誘導MG63細胞產生大量干擾素。MG63細胞可以用于3D細胞培養，也是一種合適的轉染宿主。

MG63細胞正常生長形態照片

提問

MG63可以用無血清凍存液凍存嗎?

回答

可以使用。不同品牌的凍存液凍存效果可能不一樣，建議凍存后次日復蘇一管檢測細胞活率及狀態沒有問題后再將剩余凍存細胞放置液氮中保存。

注 意 事 項

不同品牌胰酶消化時間差別較大，注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔，不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態

無血清凍存液的使用方法分享：

選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。

1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于離心管中；

2.按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數；

3.取所需細胞數的細胞懸浮液置于離心管中，900rpm離心3min，棄上清；

4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為1x106至2x106 cells/ml，緩慢地混合均勻，制成細胞混合液；

5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標示細胞名稱的凍存管中；

6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，過夜冷凍保存，第二天移至-196℃液氮罐。