人支氣管成纖維細胞該如何培養(yǎng)？

　　成纖維細胞(fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，細胞呈梭形或扁的星狀，具有突起。根據(jù)不同的功能活動狀態(tài)，將細胞分為成纖維細胞和纖維細胞二型：成纖維細胞乃是功能活動旺盛的細胞，細胞和細胞核較大，輪廓清楚，核仁大而明顯，細胞質(zhì)弱嗜堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動；纖維細胞(fibrocy te)功能活動不活躍，細胞輪廓不明顯，核小著色深，核仁不明顯，細胞質(zhì)少。此二型細胞可互相轉(zhuǎn)化。
 

　　人支氣管成纖維細胞培養(yǎng)：
 

　　可用酶消化法或組織塊法，其中組織塊法又因其操作簡便、條件易于控制而應用更為普遍。通常，以酶消化法獲得的成纖維細胞懸液在接種后5～10min即可見細胞以偽足初期附著，與 底物形成一些接觸點；然后細胞逐漸呈放射狀伸展，胞體的中心部分亦隨之變扁平；大約在接種后30min，呈現(xiàn)成纖維細胞的形態(tài)。
 

　　采用組織塊法則大約在接種后2～3天到1周左右，在接種的皮膚組織塊周圍長出細胞。待細胞融合成片，鋪滿培養(yǎng)容器底壁大部分時即可進行傳代。一般都采用 胰蛋白酶(trypsin)，將成纖維細胞從底壁消化下來后分瓶作傳代培養(yǎng)。成纖維細胞在體外培養(yǎng)條件下能保持良好的分裂增殖能力。細胞分裂時變?yōu)榍蛐危环至押笥制戒佋诟街锏谋砻娉蔀橛型黄鸬谋馄郊毎ｓw外培養(yǎng)的成纖維細胞，其生命期限與物種等因素有關(guān)。
 

　　例如：人支氣管成纖維細胞約可培養(yǎng)50代；恒河猴皮膚成纖維細胞能傳代超過40代；雞胚成纖維細胞則只有少數(shù)能培養(yǎng)30代；而小鼠成纖維細胞多數(shù)只能生長8代左右。另外，從老年個體取得的成纖維細胞的壽命要比取自年輕者短。由于在細胞傳代和進行體外培養(yǎng)時，細胞的生物學特性會逐漸發(fā)生一些不同于體內(nèi)的改變，故通常只將代視這正常細胞，可在此時將生長旺盛的成纖維細胞凍存起來，以備將來復蘇使用，這在將培養(yǎng)的細胞由動物實驗向人體實驗過渡的過程中必須給予足夠的重視。