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細胞容易污染?如何正確凍存細胞

更新時間:2022-06-15瀏覽:1417次

隨著實驗室細胞培養(yǎng)的發(fā)展,除了原代培養(yǎng)之外,還將建立開發(fā)或獲得眾多的細胞系。每一個細胞系均擴大了其起源細胞的應(yīng)用,成為有價值的資源。若該細胞系頗為*,則其可能是不可替換的;替換至少也是昂貴與耗時的。因此,必須通過保存細胞系來保證這種重要投資。


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由于培養(yǎng)早期傳代培養(yǎng)的選擇,有限細胞系的衰老以及連續(xù)細胞系的遺傳和表現(xiàn)不穩(wěn)定性,使細胞系在連續(xù)培養(yǎng)時有變異傾向。

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此外,即使在管理好的實驗室中也有可能發(fā)生儀器故障和污染。交叉污染以及錯誤辨識的發(fā)生率也很高。因此,存在諸多理由進行冷凍儲存細胞,總體概述有幾大不得不凍存細胞的理由:




①由于遺傳不穩(wěn)定性而導(dǎo)致基因漂移;

②衰老,最后導(dǎo)致細胞系消失;

③生長特性的轉(zhuǎn)化以及惡性相關(guān)特性的獲得;

④由于選擇和去分化導(dǎo)致表型的不穩(wěn)定性;

⑤微生物污染;

⑥其他細胞系的交叉污染;

⑦由于操作粗心而導(dǎo)致的錯誤鑒別;

⑧孵育箱故障;

⑨對于保存那些不立即使用的細胞系,可節(jié)省時間和材料;

⑩需要將細胞系轉(zhuǎn)給其他使用者。

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在考慮凍存細胞之前,需滿足以下特定條件:




01

確認凍存前需證實細胞系未受污染,且確為該細胞系。盡管對于新獲得的細胞系,可以在*確認前凍存幾支,但在大量凍存前應(yīng)進行*確認。


凍存時間,如果是有限細胞系,這些細胞應(yīng)經(jīng)5代倍增生長,獲得足夠量的細胞再進行凍存。連續(xù)細胞系應(yīng)將其克隆化,選擇特征性的克隆,待生長至足夠數(shù)量再進行凍存。連續(xù)細胞系有其優(yōu)勢:它們可無限生長,生長比較迅速,容易克隆,但是它們?nèi)狈z傳穩(wěn)定性。有限細胞系通常或接近二倍體。在一定傳代水平間是穩(wěn)定的,但是,它們很難克隆,生長緩慢,最終死亡或發(fā)生轉(zhuǎn)化。

02



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推薦產(chǎn)品

【SNL-018】人胚肺細胞

【SNS-002】特級胎牛血清

【SNM-002D】DMEM高糖(含丙酮酸鈉、谷氨酰胺,含雙抗)


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公司主要研發(fā)生產(chǎn)細胞系、原代細胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、*培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品,提供細胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購;細胞庫凍存細胞系500余種,同時通過不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類;公司還提供人源細胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等。


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