原代細胞的培養(yǎng)應用及分離注意事項

　　原代細胞培養(yǎng)的應用：
 

　　1、為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；
 

　　2、為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件；
 

　　3、服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。
 

　　原代細胞培養(yǎng)之分離注意事項：
 

　　組織塊培養(yǎng)法：
 

　　1)組織塊接種后的前3天，在觀察和移動的過程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動和振動，否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。
 

　　2)加入的培養(yǎng)液不宜過多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。
 

　　3)當細胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細胞，它們產(chǎn)生的有毒物質會影響原代細胞的生長。
 

　　4)為促進組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上，可以在種植前先將膠原薄層涂在培養(yǎng)瓶底壁上。
 

　　原代細胞與細胞系有什么區(qū)別？
 

　　根據(jù)傳統(tǒng)定義，自組織第一次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞直接從組織分離，生命周期有限，經(jīng)數(shù)次傳代后會逐漸停止生長。原代細胞在有限的生命周期內需掌握好細胞的最大生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的一致性。
 

　　細胞系是不斷生長、分化的細胞群，因其經(jīng)過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。
 

　　但實際上，經(jīng)過長時間、連續(xù)的傳代培養(yǎng)后，細胞系隨著代數(shù)的增加，細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
 

　　需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群，除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。