raw264.7細胞培養經驗分享

　　raw264.7細胞源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤。sIg-,Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點形成試驗陰性。可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖。可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。LPS或PPD處理2天可誘導分解紅血球但對腫瘤靶細胞無作用。

　　raw264.7細胞培養經驗：

　　1.基本情況：小鼠來源白血病毒誘導腫瘤細胞，屬于巨噬細胞，貼壁生長。下圖是ATCC來源。主流觀點是以橢圓圓形細胞為主，激活分化后才有觸角。

　　形態以類圓形和不規則為主，一般1--2個核，極少數有3個核，胞漿伸展時胞體較大。鏡下細胞為小珍珠似的圓形橢圓形。

　　2.培養情況

　　培養條件：10%FBS+高糖DMEN，進口gibco血清更好

　　傳代：細胞增殖較快，70%即可傳代，細胞有觸角也提示需要傳代，1：3----1:6傳代，推薦使用皿。傳代時切記不要使用胰酶，正常情況下此細胞貼壁不牢，直接吹打即可，胰酶消化會使細胞伸出觸角改變形態。我是直接用培養基吹打，也可以用PBS，感覺無差異。這個細胞增殖較快，培養基消耗快容易變黃，要勤換液。

　　凍存和復蘇：和普通細胞無異。

　　raw264.7細胞作為巨噬細胞有很強的吞噬能力，吞噬抗原后伸出長角，就是大家常見的偽足。同時貼壁黏附能力增強，傳代時難以消化下來。該細胞貼壁時間短，成片生長，似小菌落般小片生長，連成一片并會疊層。傳代密度不易過高或者過低，過低會導致細胞生長緩慢甚至不生長，過高，細胞會長出偽足。

　　3.關于RAW264.7分化，正常細胞為貼壁不牢的圓形橢圓形細胞，分化后伸出偽足，貼壁能力增強。

　　避免方法：

　　1，血清建議采用進口的真血清，

　　2，密度不要太高或者太低，傳代時切不可拖延時間，

　　3，傳代時切不可胰酶消化，直接吹打就能下來，

　　4，不要污染，包括其他細胞株的污染。